火锅汤料中壳成分的有效液相色谱检测法
壳由于其具有兴奋、镇痛等麻醉作用,而且有成瘾性,所以一些火锅餐馆的经营者在火锅底料中加入壳以此来招揽生意,牟取暴利。因此**建立较有效的检测方法,制止这种违法行为。目前对壳的测定有薄层法、液相色谱法、气质联用法和毛细管电泳法等,而现有的测定方法中令人满意的方法不多。由于火锅汤料中的食物成分较多、组分十分复杂,所以我们山东鲁创分析仪器有限公司在参考有关文献资料…的基础上,经过大量的试验,建立了有效液相色谱法检测火锅汤料中壳成分的方法,为鉴别和分析壳成分提供可靠依据。
实验部分:
1.仪器LC-3000有效液相色谱仪;C18不锈钢柱(VP—ODS)150L×4.6;SPD一10AVP紫外检测器。
2.试剂
、、、、碱标准品,硅钨
空白试验
经实验表明,样品处理过程中加入的试剂除所
加有干扰峰外,其他不干扰待测组分的测定,但所加的经过烘箱60℃挥蒸2h后,即可消除干扰峰。
3.样品处理条件试验
由于火锅汤料中成分较复杂,又含有大量的脂肪和蛋白质,因此用硅钨酸沉淀生物碱前,**先除去这些成份,用石油醚除去脂肪,用三除去蛋白质,然后用硅钨酸沉淀生物碱,就可以拥有满意结果。
4.仪器分离条件选择经实验表明,只有当流动相nm
甲醇:水=98:2、柱温30℃、流速1.3ml/min、检测波长为216时,分离效果较好,可拥有满意图谱。
5.壳的鉴定酸、三、石油醚、、甲醇、氨水均为分析纯。
6.色谱条件
柱温:30℃;流动相:甲醇:水=98:2;流速:am。
mE/min;uV检测波长:216 壳中所含生物碱有20多种,主要是碱、码啡、、、5种,5种物质的保留呈游离态的生物碱,多不溶于或难溶于水,而易溶于有机溶剂。生物碱可与酸结合生成盐,易溶于水,而不溶于有机溶剂中,生物碱的盐类在碱性溶液中,生物碱又会游离出来[2|。
7.标准品的测定
取少量碱、、、、
8.汤料中壳的鉴定
在壳、汤料、汤料+壳3种试液的分析图谱中,壳提取液和汤料的色谱图明显不同,主要表现在主成份的保留时间、相对吸收峰面积上,而加有壳汤料的色谱图正好是壳提取液和汤料2个色谱图的叠加,说明汤料和壳的主要成分明显不同,这对壳的鉴定有重要意义。
取50ml汤料及50rIll加有壳的滤液,
标准品,分别加入1ml甲醇溶液,待检。
9.壳的前处理rain,过滤。滤液待检。
10.样品的检测
取适量壳加200ml水煮沸10
分别用10%HCI调节pH1.8—2.0,用50ml石油醚分离样品中脂肪,去掉醚层,将去除脂肪后的样液中加入20%三,10ml沉淀蛋白质,离心分离(4500r/min)20rain后,取上清液,加5%硅钨酸5ml摇匀,使沉淀作用,置沸水浴中加热5
放冷,离心分离(3000r/rain)使之沉淀.