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Agilent 1260液相色谱仪安装场地准备通知

尊敬的用户： 感谢您选购了杭州瑞析科技有限公司的液相色谱仪，为了保证您的仪器能够顺利完成安装，请根据所购仪器的配置，在仪器到货前准备好以下条件，多谢合作！

1、用户的职责：

1.1 用户需确保其场地准备符合仪器安装的所有要求，包括场地大小，电源，气源及其它与安装有关的必需品，（详见下列各项。）
1.2 在安捷伦工程师提供安装和现场培训时间里，具体负责操作仪器的用户须全程在现场，以免漏掉重要的操作、维护及安全信息。

2、环境要求

2.1 推荐实验室温度为 20－27°C，温度变化＜3°C/hr，相对湿度＜80％
2.2 推荐液相色谱仪工作台，长 2米、宽0.8米，承重大于80公斤。建议离墙距离0.3米以上。

3、电源要求

3.1 单相交流220V，(+5% ~ -10%)，50-60Hz，有单独的良好接地。
3.2 若电压不稳，需配置稳压电源，功率大于2.5千瓦。
3.3 准备2个合格的万用接线板，总数不小于10个扁平三角接线插座。

4、溶剂要求

4.1 二次重蒸馏水，1000毫升以上（建议用0.45微米水相滤膜过滤）。
4.2 乙腈或甲醇（色谱纯或优级纯），1500毫升以上（建议用0.45微米有机相滤膜过滤）。
4.3 如有电化学检测器(ECD)，另需准备500毫升1N的硝酸（分析纯）和少量。

5、特别说明

5.1 当您提货时，若发现包装已经破损或有违反运输要求的情况，请让运输部门签字确认，并务必与商检部门联系解决。
5.2 仪器到货前您应完善上述工作，并在仪器到货后尽快申请安装，仪器保修期将从安装之日起开始计算。如果仪器发货后四十五天内仍无法安装，仪器将于发货后第四十六天起自动开始保修期。（特殊原因须提前提出延期安装申请，以免损失您仪器的保修期）
5.3 仪器到现场后，请勿自行开箱，必须由技术人员在安装时开箱验货。
5.4 为更好地安排安装工作，请于仪器到货后提前一周向用户服务中心申请安装。
杭州瑞析科技有限公司
技术部

泵是液相色谱的核心，泵将流动相从溶剂瓶输送到液相流路系统中，并要在高压下保持流量和压力的稳定。泵的状态正常是液相色谱准确分析的基础，所以平日一定要重视对泵的维护。下面就安捷伦1100/1200液相色谱泵的日常维护进行简要的介绍。

1. 流动相的准备

为了防止颗粒性物质对泵组件的磨损，流动相（特别是水相）应该新鲜配置并且过滤。上机前对流动相进行适当的超声脱气，以保证更好的在线脱气和在线混合的效果。

2.比例阀溶剂通道的分配

四元泵的比例阀有A、B、C、D四个通道，建议将盐溶液接在下面的通道（A或D），将有机溶剂接在上面的通道（B 或C）上,也就是有机通道在盐溶液通道的上面。且建议用水定期冲洗所有比例阀通道除去可能在阀口析出的盐结晶。

3．过滤白头的维护

过滤白头位于排气阀内，是一种聚四氟乙烯材质的微孔过滤芯，用于过滤流动相中的微粒，是经常需要维护的地方。当系统压力有异常增高时，首先需要检查过滤白头是否阻塞了。判断的方法是：打开排气阀，以纯水作流动相，将流速设为5mL/min，如果泵压超过10bar，则说明过滤白头需要更换了。对过滤白头的预防性维护通常可以是1~2个月更换1次，更换时同时检查一下过滤白头前面的密封金垫，如果发现变形，也应及时更换。 如果过滤白头更换过于频繁，则需要认真检查一下流动相的品质，确保流动相上机前过滤，确保使用了合适的过滤膜。如果流动相有长菌现象，除了配置新的溶剂，还应对相应的溶剂管线和脱气机通道进行*的清洗。

4．柱塞杆与柱塞密封圈的维护

柱塞密封圈套在柱塞杆上用于隔离泵与外界，工作时，它和柱塞杆进行频繁的往复摩擦，使用一段时间后，会有一定的磨损，因而密封圈需要定期更换以保证系统的密封性。更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕。有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并降低密封垫的使用寿命。应尽早更换有划痕的活塞。 柱塞密封圈有反相和正相之分，反相密封圈为黑色，石墨Teflon材质；正相呈橘黄色，聚乙烯材质，更适用于正相溶剂。1100/1200标配的是反相密封圈，正相应用时，需要更换为正相密封圈。 盐溶液对柱塞密封圈的寿命有着很大的影响，使用有盐溶液作为流动相的体系时，要注意盐溶液通道的清洗，千万不能让盐溶液在系统中过夜，常常一个晚上析出的盐粒就会造成系统堵塞，对泵产生较大的损害。为了延长密封圈和柱塞杆的寿命，在经常使用较高浓度的缓冲盐溶液的情况下，建议安装柱塞清洗附件。柱塞清洗的原理在于：柱塞泵在工作时，虽然有密封圈密封，但由于毛细作用，还是会有一些流动相渗入到密封圈与柱塞杆之间。如果流动相中有缓冲盐，当柱塞杆壁上的溶剂挥发掉后，极细小的盐粒留了下来。这样的盐粒就象砂纸一样磨损着柱塞杆和柱塞密封圈，会大大降低柱塞杆和密封圈的寿命。柱塞清洗附件是在柱塞杆的中间加入了一个可以有水流过的腔体，通过水不断的流动，就可以带走渗进来的盐溶液，防止了盐粒的析出，保护了柱塞杆和柱塞密封圈。通常我们往柱塞清洗的水里加入10％的异丙醇，可以减小水的张力，便于清洗液流动，并且抑制长菌。但有一点要注意的是，装有柱塞清洗附件的泵头，清洗液流量可以很小（如没分钟几滴），但一定不要让清洗通道里干涸，如果水流光了，应该尽快换上新的溶液。否则会减少柱塞杆和密封圈的寿命。

5．主动阀的维护

主动阀是流动相进入泵体的门户。如果我们发现流量为零，流量不稳，或泵压波动特别大，常常都是因为主动阀漏或是堵了。主动阀里面装有一个小的单向阀芯，我们将其取下，在异丙醇内超声清洗一下，一般能解决这样的问题。如果超声不能解决问题的话，可以更换该阀芯。对于经常使用缓冲盐体系的用户，手头常备一个这样的阀芯是非常有用的，往往可以及时解决问题，大大的降低停机带来的损失。

6．出口阀的维护

出口阀内部也有，如果有盐粒或其它杂质渗入其中，也会造成出口阀的堵或漏，常常表现为压力的异常波动。通常我们可以用异丙醇或60度左右的热水冲洗系统，如果无效，在异丙醇中超声清洗它常常会解决这样的问题。

1、Agilent 1260 LC现场培训教材

一、目录
二、 培训目的 ........................................................................ 3
三、 培训准备 .......................................................................... 3
1. 仪器准备 .............................................................................. 3
2. 溶剂准备 .......................................................................... 3
四、 方法建立 ......................................................................... 3
1. 开机准备 .......................................................................... 3
2. 数据采集方法编辑 ................................................................... 9
G1310A(单元泵) ........................................................................9
G1312X(二元泵)/G1311X(四元泵) ......................................................... 10
G1313A(标准型自动进样器)，G1329B(自动控温自动进样器) ......................................... 11
G1367E(高性能自动进样器) ............................................................. 12
G1328A(手动进样器) ................................................................... 14
G1316A/C (柱温箱) .....................................................................15
G1314BC/E/F(可变波长紫外检测器) ...................................................... 15
G1315C/D ,G4212A/B(二极管阵列检测器)/ G1365C/D(多波长紫外检测器) ..................... 17
G1362A(示差检测器) .................................................................... 18
G1321A(荧光检测器) ..................................................................... 19
G4218A(蒸发光散射检测器) ................................................................. 21
3. 数据分析方法编辑 .................................................................... 22
谱图优化 ................................................................................. 22
积分参数优化 ............................................................................ 23
校正 ..................................................................................... 25
打印报告 ................................................................................ 27
光谱 ....................................................................................28
4. 建立全新完整方法向导................................................................. 30
5. 进样 ................................................................................... 30
单针进样 .................................................................................. 30
序列进样 ................................................................................. 31
五、 关机......................................................................................... 33
1. 关闭检测器的灯 ............................................................................... 33
2. 冲洗系统 ....................................................................................... 33
3. 封存色谱柱 ......................................................................................... 33
4. 关闭电脑 ...................................................................................... 33
5. 关闭模块 .......................................................................................... 33
六、 RRLC(快速液相)注意事项 ............................................................ 33
七、 特殊检测器的注意事项........................................................................... 35
八、 Agilent 1260 常见问题解决方法 ..................................................... 37
附一、 维护知识 ....................................................................................... 39
附二、 注册OpenLAB CDS 许可证的流程 .............................................. 41
下载Agilent 1260 液相现场培训手册

安捷伦1260高效液相色谱仪用户手册下载

1、美国安捷伦Agilent 1260 四元梯度泵系统+紫外检测器+手动进样器+原装工作站配置清单

2、美国安捷伦Agilent 1260 二元梯度泵系统+紫外检测器+100位自动进样器+可降温柱温箱+原装工作站

1、仪器参数

Agilent 1260 液相色谱仪性能说明和技术指标，分模块指标

1. 溶剂输送系统（单元泵、二元泵、四元泵）相同指标

串联双柱塞往复泵，伺服控制主动入口阀, 可变冲程（20mL～100mL）设计；用户自主溶剂压缩因子设置，保证在不同流速及不同流动相组成的流速稳定性。自动柱塞清洗装置，有效防止高盐浓度流动相对柱塞的磨损，实时维护泵的使用性能。
流速精密度：<0.07%RSD或≤0.02min SD
流速准确度：±1%或10uL/min
压力脉动：< 1%
pH范围：1.0~12.5
1.1 单元泵（G1310B）
流速范围：0.001~10.0mL/min, 0.001mL/min步进
压力范围：0~40 Mpa（0~400bar，0~5880psi），<5mL/min；
0~20 Mpa（0~200bar，0~2950psi），0~10mL/min
功能扩展：可升级成为四元泵
1.2 二元泵（G1312C）
双高压泵头集成于同一组件中，限度减小系统延迟体积，并保证梯度混合准确度及精密度。
流速范围：0.001~5.0mL/min, 0.001mL/min步进
操作压力：
G1312C 0~40 MPa (0~400 bar, 0~5880psi)
梯度组成精密度：<0.15% RSD
梯度组成准确度：±0.5%
梯度延迟体积：
G1312A 180~480mL，600~900mL带混合器 (与反压相关)
功能扩展：在线真空脱气机，溶剂选择阀。
1.2.1二元泵（G1312B）
液压系统:双活塞串联具有的伺服控制可变冲程驱动、浮动活塞
可设置流速范围设定值为 0.001 – 5 mL/min，
增量为 0.001 mL/min
流速范围0.05 – 5.0 mL/min
压力操作范围操作范围:0–60MPa (0-600bar,0–8700psi)，达5mL/min
梯度组成精密度：≤ 0.07 % RSD 或 ≤ 0.02 min SD，取较大值
梯度组成准确度：±1% 或10μL/min,取较大值在10MPa(100 bar压力下，通过泵送脱气
H2O 测得)
梯度延迟体积：600–800μL，（包括400μL混合器），取决于反压
低延迟体积配置：120μL
功能扩展：在线真空脱气机，溶剂选择阀。

一、安捷伦 1260 Infinity VL 型四元泵

1、流量
流量精度：≤0.07 % RSD 或 0.02 min SD，取较大值者（基于恒定室温下的保留时间计算而得）
流量准确度：±1 % 或 10 μL/min，取较大值者（100 bar，水流量）。
范围：设定值从 0.001 到 10.0 mL/min，增量 0.001 ml/min
2、压力
工作范围：
1）1260 Infinity VL 型四元泵：
40 MPa (400 bar, 5880 psi) 5 ml/min
0 - 20 MPa (0 - 200 bar, 0 - 2950 psi) 10 ml/min
脉动：流速为 1 mL/min 异丙醇时，所有压力 >1 MPa (> 10 bar, >147 psi) 下， 增幅小于2 % (一般 小于1.3 %) ……需要值 - TBD
可压缩性补偿：用户可以选择，根据流动相可压缩性设定。
3、梯度
延迟体积：1260 Infinity VL 型四元泵：800 - 1100 μL，取决于背压
混合精度：在 0.2 mL/min 和 1 mL/min 时，<0.20 % SD
4、pH 范围
推荐范围：1.0 - 12.5；pH 小于2.3 时，溶剂中不能含有酸，否则将损伤不锈钢
5、脱气
集成的脱气元件：4 个通道，10 ml/min

二、自动进样器

安捷伦 1260 Infinity 标准自动进样器的性能指标
在装有 100 μL 标准计量头时有效
1、进样量范围：
0.1 - 100 μL，增量为 0.1 μL
带多次抽取升级工具包（需要改动硬件）时达 1500 μL
2、精度：在 5-100 μL内，<0.25% RSD，1-5 μL 内， <1% , 可变体积
3、样品黏度范围：0.2 ~ 50 cp
4、样品容量：
1 个样品盘上 100 × 2 ml 样品瓶，
1/2盘上 40 × 2 ml 样品瓶
1/2盘上 15 × 6 ml (安捷伦样品瓶)
5、进样循环时间：一般为 50 秒，取决于抽取速度和进样量
6、交叉污染：一般 < 0.1 %, < 带外部针头清洗时为 0.05 %
7、操作压力范围： 600 bar (60 MPa 或 8702 psi)
安捷伦 1260 Infinity 标准自动进样器的性能指标
在装有 900 μL 标准计量头时有效
1、进样量范围：
0.1 - 900μL，增量为 0.1μL （推荐增量为 1μL）
使用多次抽取升级工具包时（需要改动硬件）达 1800μL
2、精度：
5-2000 μL 内，峰面积精度一般 < 0.5 % RSD
2000 - 5000 μL内，峰面积精度一般 < 1 % RSD
1 - 5 μL内，峰面积精度一般 < 3 % RSD
可变体积
3、样品黏度范围：0.2 ~ 5 cp
4、样品容量：
1 个样品盘上 100 × 2 ml 样品瓶，
1/2 盘上 40 × 2 ml 样品瓶
1/2 盘上 15 × 6 ml (安捷伦样品瓶)
5、进样循环时间：一般为 50 秒，取决于抽取速度和进样量
6、交叉污染：一般 < 0.1 %, < 带外部针头清洗时为0.05 %
7、操作压力范围： 200 bar (20 MPa 或 2901 psi) 1260 Infinity 高性能自动进样器的性能指标 1、通讯：局域网 (CAN)。RS232C, APG-远程标准,?可选的四个外部触点闭合和 BCD 数字输出
2、安全功能：渗漏检测和安全渗漏处理、维护；区域低压、错误检测和显示
3、进样量范围：
0.1 - 100 μL，增量为 0.1 μL
带多次抽取组件（需改动硬件）时达 1500 μL
4、进样精度：
5 ~ 40 μL内，<0.25%
2~ 5 μL 内，<0.5%
1~ 2μL 内，<0.7%
0.5~ 1μL 内<1.5%，
5、进样准确度：± 1% (10 μL, n=10)
6、样品黏度范围：0.2~ 5 cp
7、样品容量：
2 个多孔板 (MTP) + 10 × 2 ml 样品瓶
2 × 54 样品瓶盘上的 108 × 2 mL样品瓶，加上 10 个附加的 2 mL 样品瓶
2 x 15 样品瓶盘上的 30 × 6 mL 样品瓶，加上 10 个附加的 2 mL 样品瓶
2 × 27 Eppendorf 管样品盘上的 54 个Eppendorf 管 (0.5/1.5/2.0mL)
也兼容安捷伦 1200 系列样品容量扩展，以进一步扩展样品容量
8、进样循环时间：常规 < 30 s 使用以下标准条件：
默认抽取速度：200 μL/min
默认推出速度：200 μL/min
进样量：5 μL
9、交叉污染 常规< 0.004 % 或 40 ppm，使用以下条件:
色谱柱：2.1 x 50 mm ZORBAX SB C18, 1.8 μm
样品：洗必泰溶于水 + 0.1 % TFA
流动相：水 + 0.05 % TFA, 乙腈 + 09.045 % TFA
流速：0.5 mL/min
梯度：0 min 30 % B,，3 min 60 % B?
进样量：1 μL 水洗外部针头 + 0.1 % TFA, 抽取和推出速度 = 100 μL/min
色谱柱温度：50 °C
MSD API-ES 阳极：SIM 离子 505.30
碎裂电压：70
气体温度：250 °C
干气流速：12 L/min
Vcap：3000V
10、GLP 特性：早期维护反馈（EMF），维护和错误信息的电子记录。

三、柱温箱（G1316A/B/）

安捷伦 1260 Infinity 柱温箱
1、温度范围：从低于室温 10℃ 到 80℃
2、温度稳定性：± 0.15℃
3、控温准确度：± 0.8℃，校准后 ± 0.5℃
4、色谱柱容量：三支 30 cm 的色谱柱
5、加热/；冷却到设定温度的时间
从室温到 40℃，需要 5 分种
从 40℃到 20℃需要 10 分钟
6、内部体积：左热交换器 3 μL；右热交换器 6 μL
7、GLP：色谱柱识别模块，用于 GLP 记录色谱柱类型
性能指标对于室温下(25 °C)的蒸馏水，温度设定为 40 °C ，流速范围从 0.1 到 5.0 mL/min时有效。

四、可变波长检测器：

安捷伦 1260 Infinity 可变波长检测器 (G1314B/F)
1、检测器类型：双光束光度计
2、光源：氘灯
3、信号数量：1
4、采集速率：80 Hz
5、噪音：± 0.25 x 10-5AU, 在 230 nm* 处
6、漂移：在 230 nm 处， 1 x 10-4AU/小时
7、线性：上限> 2.5 AU
8、波长范围：190 ~ 600 nm
9、波长准确度：± 1 nm, 用氘灯进行自动校准，用氧化钬滤光片进行验证
10、狭缝宽度：整个波长范围内，一般 6.5 nm
11、按时间编程：波长，极性，峰宽，灯开/关
12、流通池：
标准型：体积 14 μl，光程 10 mm ，压力 40 bar（580 psi）
高压型（用于 SFC）：体积 14 μl，光程 10 mm，压力 400 bar（5802 psi）
微量型：体积 2 μl，光程 3 mm，压力 120 bar（1741 psi）
半微量型：体积 5 μL，光程 6 mm，压力 40 bar（580 psi）
13、光谱工具：停流光谱扫描
14、模拟输出：记录仪/积分仪，100 mV 或 1 V，1 个信号输出
15、通讯：
LAN，控制器局域网（CAN），RS-232C, APG 远程控制：就绪；
开始、停止和关闭；
信号

五． 二极管阵列检测器（G1315C/D）

直线形的光路设计，限度减少光传播过程的能量损失，确保检测及光谱扫描灵敏度。所有光学元件均置于精密的温度控制，*避免温度波动引起的基线抖动。多种尺寸的流通池，满足不同流速范围和检测灵敏度的需求。
光源：氘灯和钨灯
波长范围：190～950nm
二极管个数：1024
全范围二极管分辨率：0.74nm
狭缝宽度：1、2、4、8、16nm
实时信号：G1315D 同时输出5个实时信号
波长精度：1nm
基线噪音：±1.0′10-5AU at 254 and 750nm（1mL/min甲醇）
基线漂移：2′10-3AU/h at 254nm （1mL/min甲醇）
线性范围：>2AU
测量范围：>2AUFS
带宽：2～400nm，可设定步长1nm
采样速率：20Hz（G1315B）；
可编程时间表：波长，峰宽，氘灯开/关，信号自动回零，峰反转，光谱存储模式，采样阈值，采样时间
信号输出：2个输出，100mV或1V

六. 荧光检测器（G1321B）

具有多信号输出和在线实时光谱扫描功能，在进样分析过程中，可同时采集激发光谱或发射光谱。 便于方法建立。
灵敏度：蒽在激发波长400nm发射波长的检出限（LOD）为10fg；
水在350nm激发波长397nm发射波长的信噪比S/N >400
光源：闪烁氙灯（标准型20W，经济型5W）
脉冲模式：单一模式296Hz; 经济模式74Hz
激发光柵：凹型全息光柵, 200~700nm波长范围, 狭缝宽度20nm
发射光柵：凹型全息光柵, 280~900nm波长范围, 狭缝宽度20nm
实时信号：可同时输出4个激发或发射波长的实时检测信号
时间编程参数：响应时间，PMT增益，基线归零，光谱参数
光谱采集：激发和发射光谱，扫描速度28ms/数据点
步进：10nm
波长重现性：±0.2nm
波长准确性：±3nm
流通池：8mL，耐压20bar（2MPa），石英材质
离线荧光光谱采集流通池：8mL，选配1mL注射器

七． 示差折光检测器（G1362A）

短期噪音：±2.5 x 10-9RIU
基线漂移：200 x 10-9RIU/h
示差折光系数范围：1.00~1.75
流通池：8mL, 耐压5bar
温控范围：室温以上5℃～55℃
时间编程: 色谱峰极性，峰宽
零校准: 自动回零
阀功能: 自动排气阀及自动溶剂回收阀
pH范围：2.3~9.5 16、GLP 特性：早期维护反馈（EMF）连续记录仪器的使用情况，如灯的使用时间和用户设定期限，并提供反馈信息。对维护和错误进行电子记录。RFID 用于电子记录流通池和 UV 等的状况（光程、容积、产品型号、序列号、测试通过和使用状况）。使用内置的氧化钬滤光片对波长准确度进行验证。
17、安全与维护：通过安捷伦手持控制器和安捷伦在线实验室顾问软件进行全面诊断、错误检测和显示。泄漏检测、安全泄漏处理、泄漏输出信号（用于关闭泵系统）。主要维护区域的电压较低。
18、其他：电子温度控制（ETC），用于整个光学元件

2、安捷伦1260高效液相色谱仪特点

提高了HPLC 标准 1260 Infinity LC 提高了HPLC 的压力上限！等度泵、四元泵和二元泵系统压力上限600 bar，流速可达5 mL/分钟，等度泵和四元泵系统压力上限200 bar 时，流速可高达10 mL/分钟，再加上80 Hz 的检测速率，以及提高10 倍的灵敏度，使通用性达到了新水平，并可实现更高的分离度和更快的分离速度。

99% HPLC 兼容性在一个系统上您既可以运行已经建立并验证的HPLC 方法（无需更改），也可以将RRLC 推向新的性能水平。

无限多样的选择 1260 Infinity LC 的模块式设计理念及溶剂输送、进样和检测的广泛选择，让您能够根据对色谱性能和灵活性的要求恰当地配置您需要的系统。无论您的应用需求是什么，您都可以充满信心地获得更高质量的数据，更快地获得结果。将模块混合搭配可配置以下系统：
• 二元、四元或等度洗脱的分析型LC
• 毛细管或纳升流速的低流速LC
• 微量、分析型或制备型纯化
• 基于工作流程及应用的LC 或LC/MS 解决方案：自动化方法开发、多方法、无人值守、高通量或高容量等解决方案

满足任何应用及预算的解决方案！为了实现的灵活性，安捷伦提供了一系列产品— 从用于常规LC 的一体式仪器到超高效LC/MS 系统。您选择的配置可以优化您实验室的每个操作环节，并保证能面相未来的挑战对每个系统进行所需的升级。

安捷伦质量指数

3、更高灵敏度

1260 Infinity 二极管阵列检测器使用了使1290 Infinity LC 成为大系统的创新技术，以80 Hz 的检测速率将HPLC 的灵敏度提高了10 倍。再加上该检测器的基线性能，您可以检测最窄的色谱峰，获得的检测限，使您充满信心地获得高质量的数据结果和更高实验室效率。

提高HPLC 的灵敏度…… 配置60 mm 光程安捷伦光强卡套式流通池后，1260 Infinity 二极管阵列检测器峰到峰之间的噪音水平达到了0.6 μAU/cm (ASTM)。这是对HPLC 检测灵敏度的改进，也体现了安捷伦的不断创新和对LC 技术的突出贡献。

灵敏度不是重要的性能特性。1260 Infinity DAD 另一个显著特点是不易受示差折光效应的影响，从而能够得到的基线
新1260 Infinity LC 提高的灵敏度，不仅使结果更加可信，还让您获得了更高的效率。
分析痕量组分时，1260 Infinity DAD 为您提供更清晰的结果。从而使您能够对样品的纯度得出更明确的结论。
通常对漂移基线上的低含量组分峰不可能进行自动积分，而是需要手动重新积分— 这是一项极其费时的工作。由于1260 Infinity DAD 灵敏度更高、基线更稳定，您可以比过去更加信任自动积分的结果，并节省了宝贵的时间。
1260 Infinity DAD 更高的灵敏度意味着您将有更多的机会直接分析样品，免除了分析前进行浓缩等复杂、费时的样品处理。
在过去的几年中，法规机构不断要求更低的检测限。有了1260 Infinity DAD，您*可以放心，您进行的这项安全投资将能满足未来几年内不断增长的需求。

4、更强的分析能力

所有1260 Infinity LC 的组件—如泵、自动进样器和阀，在分析流速范围内，现在都可以在高达600 bar 的压力下操作，达到了效率、数据质量和稳定性的新水平，为您的结果提供了的置信度。

HPLC 和RRLC 均能兼顾，即使在今天，许多已建立的方法仍然在使用大粒径色谱柱。反之，新开发的方法更常使用小粒径柱，后者能提供更高的分离效率。有了更高的分离效率可以通过减少柱长缩短分离时间；也可以保持柱长和分离时间，但获得更高的色谱分离度。

购买1260 Infinity 泵，您进行的是一项适应未来需求的投资—并没有在LC 系统上花费更多的经费。如果您想发掘单位时间内的分离度，可以详细考察一下1290 Infinity LC 系统，其分析能力是1260 Infinity LC 的2倍—是其它HPLC 系统的3 倍。

全面反向兼容性 1260 Infinity LC 为您提供全面反向兼容性。这意味着您可以在同一系统上运行已经建立并验证的方法。

如果您的分离复杂性中等，在色谱峰之间有足够的分离度，使用具有同样分离效率的亚-2-微米短柱将大大缩短分析时间，从而显著提高工作通量。
采用更小粒径色谱柱提高分析的分离度，使相邻洗脱化合物得到更好分离。提高结果的置信度，减少不确定结果和重复分析的数量。

5、Agilent 1260 Infinity 四元泵和等度泵液相色谱系统

用1260 Infinity 等度泵和四元泵液相色谱系统，将标准HPLC 应用提高到新水平。由于有了更高质量的数据和更快地获得分析结果的能力，您实验室的效率和结果的可靠性将得到提高。

标准应用的填充常规填料、亚二微米填料或表面多孔填料的标准内径4.6 mm 和3.0 mm ID 色谱柱，非常适用于1260 Infinity 等度泵和四元泵液相色谱系统。您可以轻松而放心地运行现有应用方法，而且还有足够的空间优化方法或使用*的方法和色谱柱技术。甚至还有足够的流速可以运行半制备应用方法—只需要增添1260 Infinity 馏分收集器。

适应未来发展、可升级的投资 1260 Infinity 等度泵和四元泵都是基于同样原理而设计的，除四元泵比例阀和新的集成式脱气单元外二者基本相同。这意味着您可以从等度泵系统开始，以后再将泵升级为四元泵系统。再进一步添加1260 Infinity 甚至1290 Infinity 组件，可使您的系统变成适用于任何应用的液相色谱。

5、更高的性能更低的价格

1260 Infinity 二元泵液相色谱系统不仅能提供RRLC 结果，而且还显著提高UV 灵敏度。其可调节的延迟体积使其既适用于标准内径色谱柱，也可作为MS 检测的前端分离仪器。

更高的检测性能新的1260 Infinity 二元泵液相色谱系统基于成功的1200 系列高分离度快速液相色谱系统，由于有了新1260 Infinity 二极管阵列检测器的高检测性能，可以提供等同于RRLC 的功能。与您已有的HPLC 和RRLC 方法全面反向兼容，且所有这些主要性能改进都是以更具吸引力的价位提供。

更高通量 1260 Infinity 二元泵液相色谱系统的高通量配置能限度地提高需要分析大量样品的实验室的效率。当用一根色谱柱进行分析时，同时用再生泵对另一根色谱柱进行清洗和再生。这种高通量配置可以将分析周期缩短50%，每日可达到2000个样品的分析通量。

使用样品容量的1290 Infinity LC 进样器HTS 或HTS 得到样品容量，并受益于1200 Infinity 系列的全混搭功能！更高的峰容量

在1260 Infinity 二元泵液相色谱系统上使用ZORBAX RRHT 长柱，可获得700 多峰容量，“相当于气相色谱的分离度”。实例中显示用ZORBAX RRHT SB-C18 柱(2.1 x 150 mm, 1.8 μm)分析BSA 裂解产物。

高效液相色谱

一.简介

仪器型号：Agilent 1200 HPLC高效液相色谱

仪器厂商：美国安捷伦 公司

仪器性能： 流速范围：0.001~5.0mL/min, 0.001mL/min步进；压力范围： 0-40 MPa (0-400 bar, 0-5880psi)；梯度组成精密度：<0.15% SD （1mL/min）。 可测项目：可用于痕量分析，其检测限为ppb～ppm级。 样品要求：样品一般需预处理。

二、实验原理 分配色谱原理：主要基于样品分子在流动相和固定相间的溶解度不同（分配作用）而实现分离的液相色谱分离模式。 C18柱-反相HPLC（reversed phase HPLC）： 由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系。其代表性的固定相是十八烷基键合硅胶，代表性的流动相是甲醇和乙腈。是当今液相色谱的最主要分离模式，几乎可用于所有能溶于极性或弱极性溶剂中的有机物质的分离。 二极管阵列检测器（diode-array detector, DAD） 以光电二极管阵列作为检测元件的UV-VIS检测器，它可构成多通道并行工作，同时检测由光栅分光，再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号，然后，对二极管阵列快速扫描采集数据，得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。（Agilent 1200 DAD全扫描波长范围为190nm-950nm） Agilent 1200 HPLC液相色谱仪的工作过程：将流动相（经过在线过滤器）以稳定的流速（或压力）输送至分析体系，在进入色谱柱之前通过自动进样器将样品导入，流动相将样品带入色谱柱，在色谱柱中各组分因在固定相中的分配系数不同而被分离，并依次随流动相流至检测器，检测到的信号送至数据系统记录、处理或保存。

三、实验步骤 开 机 1)将待测样品按要求前处理，准备HPLC所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等。 2)开机。打开电脑、HPLC各组件电源、打开软件。 3)打开工作界面，按操作要求赶流动相气泡。（排气：打开“Purge”阀，点击“Pump”图标，点击“Setup pump”选项，进入泵编辑画面，设Flow：3-5ml/min，点击“OK”。 点击“ Pump ”图标，点击“Pump control”选项，选中“On”，点击“OK”，则系统开始Purge，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道（A-B-C）继续Purge，直到所有要用通道无气泡为止。点击“Pump”图标，点击“Pump Control”选项，选中“Off”，点击“Ok”关泵， 关闭Purge valve。 点击“Pump”图标，点击“Setup pump”选项，设Flow：1.5ml/min。） 4)配置仪器 （配置1200系统模块，根据需要配置） 5)建立平衡柱子分析方法，保存并运行。 编辑方法及样品分析 1)方法信息：从“Method”菜单中选择“Edit entire method” 项，如上图所示选中除“Dataanalysis ”外的三项，点击“Ok”，进入下一画面。在“Method Comments”中写入方法的信息。点击“Ok” 进入下一画面。 2)自动进样器参数设定:选择合适的进样方式, “Standard Injection”----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“Injection with Needle Wash”----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。“Use injectorprogram”---可以点击“Edit ”键进行进样程序编辑。点击“Ok”进入下一画面。 3)泵参数设定：（以四元泵为例）在“Flow”处输入流量,如1.5ml/min ， 在“Solvent B”处输入70,(A=100-B-C-D) ,也可Insert 一行”Timetable”，编辑梯度。在“Pressure LimitsMax”处输入柱子的耐高压，以保护柱子。点击“Ok”进入下一画面。 4)柱温箱参数设定:在”Temperature”下面的空白方框内输入所需温度,并选中它。 5)DAD检测器参数设定：：检测波长：一般选择吸收处的波长。样品带宽BW： 一般选择吸收值一半处的整个宽度。参比波长：一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域 。参比带宽BW：至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。Peak width（Response time）：其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。Slit-狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。同时可以输入采集光谱方式，步长，范围，阈值。选中所用的灯。 6)FLD检测器参数设定: Excitation A: 激发波长:200-700nm,步长为1nm,或Zero Order。Emission: 发射波长: 280-900nm, 步长为1nm,或Zero Order。同时可以输入范围Range、步长step、采集光谱。 7)运行序列：新建序列，在序列参数中输入样品信息，在序列表中输入样品位置，方法等，运行该序列，等仪器显示ready，可运行样品 数据分析 1)从“View”菜单中，点击“Data analysis”进入数据分析画面。 2)从“File”菜单选择“Load signal”， 选中您的数据文件名， 则数据被调出。 3)从“Integration”菜单中选择“Integration Events”选项，如下图所示。选择合适的“Slope sensitivity”，“Peak width”，“Area reject”，“Height reject”。 4)从“Integration”菜单中选择“Integrate”选项， 则数据被积分。 5)如积分结果不理想，则修改相应的积分参数，直到满意为止。 关机 1)关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。 2)退出化学工作站，依提示关泵，及其它窗口，关闭计算机（用shut down 3)关）。 4)关闭Agilent 1200各模块电源开关。 五、Agilent 1200 LC维护保养： 1)色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死（乙睛/甲醇适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相）。 2)流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。 3)使用含盐流动相，要配制90%水+10%异丙醇，开启seal-wash清洗泵， 4)溶剂不能干涸。