液相色谱仪流动相使用时的10个坏习惯

大家在液相色谱仪流动相使用过程中除了有所为，还要有所不为，那有哪些习惯是需要避免的呢？

1、加入有机相之后再测量流动相的PH值

通常情况下测量流动相的PH值，是测量水相中的PH值参数。有机相加入之后PH值参数的测量就和之前有误差。

PS：但如果能保证每次测量都是加入相同量的有机相之后得到的PH值，虽然这不能保证精确度，但是这能保证前后一致的测量结果，所以这样也没有问题。

2、不使用缓冲盐

缓冲盐的加入是用来控制和修正流动相中PH值的改变的。样品基质、空气中的CO2、水中的杂质都会造成流动相PH值的改变，而PH值的改变会影响样品的保留、峰形、峰面积参数。

3、没有在正确的缓冲区间使用缓冲盐

每个缓冲盐都有一定的缓冲范围，在此范围内它提供了的pH稳定性。在这个范围外，缓冲盐在抵抗pH值变化方面是无效的。所以要么在正确的范围内使用缓冲盐，要么选择一个缓冲范围覆盖所需pH值的缓冲盐。

4、向有机相中加入缓冲盐

如果将水相的缓冲溶液加入到有机相中，会大大增加缓冲盐析出的风险。缓冲盐的析出在初期可能并不明显，但会对仪器的各个部件都会产生一定影响。（延伸阅读：做完样品记得移除系统中的缓冲盐哦！）

5、梯度洗脱时直接用泵去混合流动相并且流动相比例从0%开始

现在的液相色谱能够非常高效的进行在线脱气和流动相混合。但是将梯度洗脱比例从0%开始，会有比较大的出现气泡和沉淀的风险。（延伸阅读：深度剖析等度洗脱和梯度洗脱的适用范围和方法设置）

6、没有使用正确的pH值修饰酸或碱作为缓冲液

缓冲溶液的修饰酸或碱，只使用生成缓冲盐的酸或碱。例如，磷酸钠缓冲液只能用磷酸或调节。

7、没有在方法中说明缓冲液的全部信息

例如只在方法中写“称5克磷酸钠溶入1000毫升水”。缓冲盐的类型决定其pH缓冲范围，而缓冲盐中所需物质的浓度决定了缓冲强度。例如：5g的无水磷酸钠和5g的一水磷酸钠具有不同的缓冲强度，会影响保留率。

8、使用仪器时不调查之前使用的流动相情况，直接用纯有机溶剂冲系统

如果之前的方法在B通道使用缓冲溶液，而这次没有经过调查就直接在B通道使用了纯的有机溶剂，那么就会造成该通道缓冲盐析出、出现堵塞等风险。

9、将溶剂瓶中的流动相用干为止

溶剂瓶中的流动相如果用干，会导致仪器中出现气泡等问题。

10、仅使用超声来给流动相脱气

超声脱气有一定的脱气作用，但脱气的效果并不理想。所以在此建议使用真空脱气机进行在线脱气。