紫外-可见分光光度计的类型很多,根据仪器结构可分为单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计三种,其中单光束分光光度计和双光束分光光度计属于单波长分光光度计。
紫外-可见分光光度计的分类:
1、单光束分光光度计从光源发出的光经单色器分光后得到一束单色光,通过吸收池后,最后照射在检测器上始终为一束光。该类型的分光光度计结构简单、价格便宜,但由于其杂散光、光源波动等影响很大,所以准确度较差。
2、双光束分光光度计从光源发出的复合光经单色器分光后的单色光被反射镜(切光器)分为强度相等的两束光,分别通过参比溶液和样品溶液。由于两束光同时通过参比溶液和样品溶液,因此能够自动消除光源强度变化所引起的误差。双光束分光光度计一般能自动记录吸收光谱曲线,其灵敏度较好,但结构较复杂、价格较贵。
3、双波长分光光度计由同一光源发出的光被分成两束,分别经过两个单色器,得到两束不同波长的单色光,再利用切光器使两束不同波长的单色光以一定频率交替照射同一溶液,然后再经过光电倍增管和电子控制系统,经过信息处理最后得到两波长处的吸光度的差值。双波长分光光度法一定程度地消除了背景干扰及共存组分的干扰,提高了分析的灵敏度。双波长分光光度计不仅可用于多组分混合试样的分析,还可以用于一般分光光度计不能测定的浑浊试样(如生物组织液)的分析。
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