分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度常用的工具之一。仪器使用频繁,但甚少见到有人维护。其实,保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。
分光光度计的检验方法:
1.波长准确度的检验:
分光光度计在使用过程中,由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因,经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象,因而导致仪器灵明度降低,影响测定结果的精度,需要进行检验。
检验波长准确度简单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的吸收峰值,如果测出的值与滤光片标准值之差超出规程规定,则需要进行波长调节。
2.透射比正确度的检验:
用透射比标准值分别为10%、20%、30%左右的光谱中性滤光片,可见光区分别在440、546、635nm波长处,以空气为参比,分别测量各滤光片的透射比,紫外光区用重铬酸钾溶液分别在235、257、313、350nm波长处,以高氯酸溶液为参比,测量其透射比。
3.稳定度的检验:
在零点不受光的条件下,用零点调节器将仪器调至零点,观察3分钟读取透射比的变化,即为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处,调节零点后,盖上样品室盖(打开光门),使光电管受光,调节透射比为95%(数显仪器调至99%)察3分钟读取透射比的变化,为光电流稳定性。
4.光的检验:
可见分光计棱镜式仪器在420nm处,光栅式仪器在360nm处,紫外分光计在220nm处分别用符合规定的截止滤光片,以空气为参比,测量其透射比值,即为仪器在相应波长下的杂散辐射率。
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